【研究分野】基礎獣医学・基礎畜産学

【研究領域課題番号】16108003 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

受精 / 体細胞初期化 / 卵巣特異的遺伝子 / 卵母細胞の死滅 / 卵母細胞の生存促進 / 卵子 / 卵胞 / ヒアルロン酸 / CD44 / マクロファージ / VEGF / GDF-9 / マウス / ミニブタ体細胞クローン / 遺伝子改変マウス / Cx43 / アポトーシス / Oct4 / 受精能 / 卵胞発育 / 卵胞閉鎖 / CD44 antigen glycosylation / 未成熟卵子凍結保存法(SWEID) / Connexin 43 / TAP発現ベクター / GDF-9遺伝子 / 体細胞初期化能 / ミトコンドリア置換 / FLIP / iRNA法 / ES細胞 / ギャップ結合構成コネクシン遺伝子

【研究成果の概要】

1個体からの受精可能卵子の大量生産を目標として卵子の細胞分化・死滅の調節系の解明を行い、新規調節因子を同定するとともに、これを踏まえ受精能・体細胞初期化能高発現卵子生産などの技術を開発した。さらに、直径70μm未満のマウス卵胞卵子由来の産子や家畜ブタ体外成熟卵子をレシピエントとする体細胞ミニブタ作出に成功した。

【研究種目】基盤研究(S)

【研究期間】2004 - 2008

【配分額】104,520千円 (直接経費: 80,400千円、間接経費: 24,120千円)

【研究分野】基礎獣医学・基礎畜産学

【研究領域課題番号】11660304 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

胸腺 / テネイシン / マウス / 初期分化 / T細胞受容体β鎖 / レパトリー形成 / CD25 / CD44 / プロT細胞

【研究成果の概要】

細胞外マトリックスのテネイシン-C(TN-C)は成体胸腺の上皮および髄質に多く発現するが、胸腺におけるTN-Cの機能については不明な点が多い。我々は非致死量X線を照射したTN-C欠損C3H/HeNマウスにおいて照射1週間以内の胸腺lin陰性CD44弱陽性CD25陽性細胞が野生型マウスより早く分化することを発見した。これは胸腺再構築時に再生源となるX線低感受性の胸腺内T細胞が分化する際にTN-Cが抑制的に働くことを強く示唆する。胸腺再生過程のTN-C産生を生化学的および免疫組織化学的に検索したところ、照射後1週間内にTN-C発現が大幅に上昇し、その発現は髄質リンパ球間および皮質血管壁などに顕著であるがファイブロネクチンやサイトケラチン18の発現部位とは異なることなどが明らかになった。
一方、MLRを調べたところ、TN-C欠損GRS/Aマウスの反応細胞は野生型BALB/cに対しTN-C欠損BALB/cより有意に低い応答を示し、TN-CがMLRを抑制することがわかった。これはTN-CがMLR全般の抑制を行っている可能性と、MLR応答に関与するT細胞クローン形成に関与している可能性を示唆する。後者の可能性を調べるため、TN-C欠損GRS/Aマウスと同野生型マウスの末梢リンパ節のT細胞受容体β鎖(Vβ)発現解析を行ったところ、両者間でVβ発現パターンに差は見られなかった。未刺激脾臓・末梢リンパ節のCD4陽性メモリー/活性型T細胞の割合では、TN-C存在が末梢T細胞のメモリーに関与する可能性が示唆された。
以上からTN-Cは胸腺細胞分化に抑制的に関与するがVβレパトリー形成には関与しないこと、TN-CによるMLR応答抑制の可能性の一つとして抹消におけるメモリーT細胞の形成促進があることなどが分かった。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】1999 - 2000

【配分額】3,200千円 (直接経費: 3,200千円)