レーザーインジェクションによる標的真核細胞およびオルガネラの遺伝子発現制御
【研究分野】植物生理・分子
【研究キーワード】
レーザーインジェクション / マイクロインジェクション / 植物細胞 / モルフォリノアンチセンスオリゴ / 遺伝子発現制御 / モルフォリノアンセチョセンスオリゴ / 植物培養細胞 / 雌性配偶体 / 花粉管ガイダンス / 遺伝子発現阻害 / 抗体 / 細胞 / オルガネラ / 顕微操作
【研究成果の概要】
独自に開発したレーザーインジェクション法(Laser-assisted Thermal-expansion Microinjection法,LTM法)を用いて、標的細胞やオルガネラの遺伝子発現制御を行うことを目指した。特に、胚嚢(雌性配偶体)が裸出するユニークな植物トレニアにおいて、遺伝子発現抑制を行い、標的遺伝子の特異的な発現の低下を確認することも目指した。その結果、トレニアの胚嚢にモルフォリノアンチセンスオリゴを導入することで、標的遺伝子を特異的にノックダウンすることに成功した。標的遺伝子として、助細胞特異的に発現する花粉管誘引ペプチド候補であるLURE1およびLURE2を用いたところ、ノックダウンにより花粉管の誘引が阻害されることが明らかとなった。この実験により、花粉管誘引物質の同定に成功するという画期的な成果につながった。モルフォリノアンチセンスオリゴが植物にも有効であることが示され、また、原生生物である粘菌においてもその有効性が示されたことから、マイクロインジェクション技術の組み合わせにより、広く真核細胞の遺伝子発現抑制に用いることの技術であることが明らかとなった。
【研究代表者】
【研究種目】基盤研究(B)
【研究期間】2007 - 2010
【配分額】17,680千円 (直接経費: 13,600千円、間接経費: 4,080千円)