Discovery Sagaサイレントキーワード俯瞰

養子免疫療法 / 抗腫瘍T細胞 / キメラ抗原受容体 / 遺伝子変異 / T細胞性リンパ腫 / エピジェネティクス / 転写因子 / メモリーT細胞 / CRISPR/Cas9

本研究では、抗腫瘍T細胞の長期生存能を高めるために、T細胞性リンパ腫細胞で変異が報告されている遺伝子群に着目して抗腫瘍T細胞に遺伝子導入を行い、その機能解析、具体的には細胞増殖能、サイトカイン分泌、細胞傷害活性などの評価を通じて、持続的な抗腫瘍効果の改善に寄与する遺伝子修飾標的を同定することを目標としている。
本年度は、これまでの探索から同定していたがん抑制遺伝子PRDM1のノックアウトによるキメラ抗原受容体(CAR)-T細胞、及び腫瘍浸潤T細胞 (TIL)の機能改善について、さらに解析を進めた。PRDM1をCRISPR/Cas9技術を用いて遺伝子レベルでノックアウトしたCAR-T細胞は、コントロールと比較して生体内における長期生存能に優れ、その結果として有意に治療効果を改善させることを、異なる標的抗原を標的とした複数のマウス腫瘍モデルにおいて示した。特に現在のところ有効な治療効果が得られていない固形がんに対するCAR-T細胞においても、同様に長期生存能の獲得が見られることを示した。その際に、生体内に残存するPRDM1ノックアウトCAR-T細胞が未分化メモリー形質を有意に維持していることも確認した。またTILについては、主に肺癌、婦人科腫瘍検体から採取した検体について、PRDM1ノックアウトの効果を検証した。いずれの検体でも末梢血T細胞と比較して終末分化がより進行していたが、PRDM1ノックアウトにより、一部のメモリー形質の再獲得が起こり、サイトカイン分泌能が改善することを確認した。これらの研究成果は学術論文として受理された (Yoshikawa et al. Blood 2022)。

腎細胞癌 / エピジェネティクス / 遺伝子変異 / 腫瘍免疫 / エピジェネシス / ヒストン修飾 / クロマチンリモデリング / PBRM1 / CD68 / HIF-2α / 癌関連遺伝子

腎細胞癌の網羅的遺伝子解析により、ヒストン修飾やクロマチンリモデリングに関わる遺伝子変異の頻出が明らかとされている。本研究では、腎細胞癌で重要なドライバー遺伝子であるHIF2Aのヒストン修飾解析を行い、活性化修飾パターンに違いがあることを見出した。
また、これらエピジェネティクスにかかわる遺伝子群の変異は、病理組織学的なグレードとT分類には影響を与えない一方で、無増悪生存期間や全生存期間の独立した有意な予後不良因子であった。さらに、いくつかの免疫細胞マーカーは、遺伝子群の変異を認める症例で有意な低下を認めており、エピジェネティクス関連遺伝子と腫瘍免疫の関係が示唆された。

手術時に転移を認めない症例でも、従来の病理診断にエピジェネティクス関連遺伝子変異の有無を加味することは、フォローアップスケジュールの決定や術後補助療法の必要性の判断などに有用な可能性があり、臨床での応用が期待される。また、転移や再発のリスクが高い非転移性腎細胞癌の術後補助療法に、腫瘍免疫を制御する薬物療法が有効である可能性が示唆されたことは、今後の発展が大いに期待される知見である。

急性骨髄性白血病 / epigenetics / 遺伝子変異 / ヒトCD34陽性細胞 / 臍帯血由来CD34陽性細胞 / PML-RARA / FLT3-ITD / DNMT3A / NPM1 / 臍帯血由来CD34陽性細 / NOGマウス / in vivoモデル

本研究は、急性骨髄性白血病（AML）に近年同定されたエピジェネティック関連遺伝子変異の生体内での機能解析を目的としたものである。これらの遺伝子変異の中で、DNMT3A変異R882Hを中心に解析を行った。これをヒト造血幹細胞（CD34陽性細胞）に導入したところ、controlに比べ骨髄単球系分化マーカーの発現は抑制され、colony assay 法では骨髄単球系コロニーは減少した。この細胞をNOGマウスに移植したが、長期に経過観察しても白血病発症は確認できなかった。これらの結果から、DNMT3A変異は単独では白血病を発症させるのには不十分であることが示唆された。

【研究分担者】
水野隆一	慶應義塾大学	医学部(信濃町)	准教授	(Kakenデータベース)

【研究分担者】
安藤潔	東海大学	医学部	教授	(Kakenデータベース)

【研究連携者】
八幡崇	東海大学	医学部	講師	(Kakenデータベース)