【研究領域課題番号】20H03666 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

Th17細胞 / 腸管免疫 / miRNA / 炎症性腸疾患 / マイクロRNA / JAK / STAT / １細胞遺伝子発現解析 / Th17 / IBD / 粘膜免疫 / micro RNA / 潰瘍性大腸炎 / クローン病 / エピジェネティクス

【研究成果の概要】

炎症性腸疾患(IBD)の病態には、T helper (Th)細胞の中でも特にIFN-g産生性Th1細胞およびIL-17産生性Th17細胞の関与が報告されてきたが、これまでのIFN-gやIL-17を標的とした生物学的製剤の効果は期待通りの効果に乏しく、IBDの治療には単一のエフェクターサイトカインやT細胞サブセットではなく、Th細胞サブセットの垣根を超えた炎症惹起性シグナルを標的とする全く新しい治療アプローチの開発が必要である。申請者は、各種の血球系細胞におけるDeep-sequencingを用いたmiRNAの網羅的発現解析よりスクリーニングを行い、miR-221/2がTh1, Th17細胞に選択的に発現する事が予想された。
今年度は、Naive T細胞、Th1, Th17, TregにおけるmiRNAの発現を網羅的に検討したところ、Th1、Th17(23) (IL-6 + IL-23により誘導したTh17)においてはmiRNA-221/2は高発現していたが、Naive T細胞やTGF-bにより誘導されたTh17(b)およびiTregではほとんど発現が見られなかった。
次に、Th1、Th17細胞の分化に重要なIL-6、IL－12、IL-23の下流の転写因子である、STAT3、STAT4、Histone markの分布をChIP-seqを用いて検討した。予想通り、miR-221/2の遺伝子座の上流に、STAT3、STAT4結合領域を複数認めた。
また、生体内におけるTh17細胞の機能を検討するために、申請者らは、miR-221/2欠損マウスを作成し、腸炎におけるmiR-221/2欠損の影響をデキストラン硫酸塩(DSS)誘引腸炎モデルを用いて検討したところ、miR-221/2欠損マウスでは、コントロールマウスと比して著明な腸炎の悪化を認めた。

【研究種目】基盤研究(B)

【研究期間】2020-04-01 - 2023-03-31

【配分額】17,680千円 (直接経費: 13,600千円、間接経費: 4,080千円)

【研究分野】ゲノム医科学

【研究領域課題番号】15K06907 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

microRNA / エピジェネティクス / 悪性リンパ腫 / HTLV-1 / ATL / 遺伝子翻訳 / リンパ腫 / B細胞リンパ腫 / シグナル伝達

【研究成果の概要】

本研究では、新たな機能的miRNAのスクリーニング法として、RISC-capture法を確立した。これにより悪性リンパ腫細胞においてmiRNAの機能が異常に低下していること、その結果本来抑制されるべきBCR経路などのシグナル伝達経路の脱制御が起こり、慢性的な活性化を引き起こすメカニズムが明らかになった。さらにmiRNA発現異常メカニズムとしてエピジェネティック異常を同定し、腫瘍化過程におけるエピゲノム異常の重要性を示した。さらに腫瘍化における遺伝子翻訳異常の重要性も明らかにし、これらに対する阻害剤が次世代創薬につながることを示した。

【研究種目】基盤研究(Ｃ)

【研究期間】2015-10-21 - 2018-03-31

【配分額】4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)

【研究分野】消化器内科学

【研究領域課題番号】24590993 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

エピゲノム変化 / ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬 / microRNA / C型肝炎ウイルス / 肝細胞癌 / Nrf2 / EZH2 / 培養細胞株 / HCV / ヒストン修飾 / エピジェネティクス / マイクロRNA / レプリコン細胞 / osteopontin / apolipoprotein-A1 / miR-122 / スベロイルアニリドヒドロキサム酸 / トリコマイシンA

【研究成果の概要】

肝細胞癌及びウイルス感染を含むその原因に対する新たな治療としてエピゲノム変化のうちヒストン修飾変化の可能性を探索することを目的とした。C型肝炎ウイルス（HCV）を感染した肝癌細胞株に対して、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬（HDACi）SAHAは、宿主細胞遺伝子発現変化を介してHCV増殖抑制効果を示し、EZH2の阻害作用により細胞増殖を抑制するものと考えられた。HCV持続感染にはNrf2遺伝子発現が重要で、HCVや細胞増殖にはNrf2, EZH2, miR-122の相互作用により影響されることが示唆された。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2012-04-01 - 2015-03-31

【配分額】5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円)

【研究分野】臨床腫瘍学

【研究領域課題番号】23680090 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

エピジェネティクス / エピジェネティック治療 / マイクロRNA / 胃がん / DNAメチル化 / ヒストン修飾

【研究成果の概要】

本研究では、胃悪性腫瘍における重要なマイクロRNAとして、胃がんにおけるmiR-29cの発現低下および胃MALTリンパ腫におけるmiR-142、-155の発現上昇をそれぞれ特定した。胃がん細胞に対しSAHAやDZNepなどのEZH2阻害薬を投与したところ、miR-1246、-302a、-4448の活性化を認めた。さらにエピジェネティクス変化により制御されているマイクロRNAを特定する独自のChIP on chip法を開発した。胃発がん過程においてマイクロRNAの発現異常は重要な役割を果たしており、エピジェネティック治療ががん抑制マイクロRNAの活性化を介して抗腫瘍効果を発揮することが示された。

【研究種目】若手研究(A)

【研究期間】2011-04-01 - 2014-03-31

【配分額】27,430千円 (直接経費: 21,100千円、間接経費: 6,330千円)

【研究分野】応用生物化学

【研究領域課題番号】21228003 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

スプライシング / イントロン / 転写 / 核-細胞質間輸送 / 非コードRNA / エピジェネティクス / 転写終結 / マイクロRNA

【研究成果の概要】

Spliceostatin A（SSA）は抗がん抗生物質FR901464 の化学的に安定な誘導体であり、研究代表者らはSSAがスプライシング因子SF3bに特異的に結合する世界初のスプライシング阻害剤であることを明らかにしてきた。SSAを用いることでスプライシング因子やイントロンの新しい機能の同定につながると考えられる。そこで本研究はSSAによって引き起こされる多様な表現型の作用機構を解析し、スプライシング因子の未知の役割の解明を目指した。その結果、pre-mRNA核内保持、転写伸長、ポリA付加、核内非コードRNAの局在制御にスプライシング因子が関与することを明らかにした。

【研究種目】基盤研究(S)

【研究期間】2009-05-11 - 2014-03-31

【配分額】199,810千円 (直接経費: 153,700千円、間接経費: 46,110千円)

【研究分野】病態医化学

【研究領域課題番号】21790327 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

マイクロRNA / エピジェネティクス / 胃がん / 機能性消化管障害 / Helicobacter pylori / 機能性ディスペプシア / エピジェネティック治療 / DNAメチル化阻害薬 / ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬 / DNAメチル化 / ヒストン修飾

【研究成果の概要】

本研究において、胃がん細胞にDNAメチル化阻害薬やヒストン脱アセチル化酵素阻害薬などを用いたエピジェネティック治療を行うことによって、がん抑制マイクロRNA miR-512-5pの発現を活性化し、標的がん遺伝子MCL1を抑制することでアポトーシスを誘導することに成功した。さらにマイクロRNAが消化管悪性腫瘍のみならず、機能性ディスペプシアをはじめとする機能性消化管障害の病理にも重要な役割を果たすことを示した。本研究の成果が消化管悪性腫瘍や機能性消化管障害の新たな治療戦略につながることが期待される。

【研究種目】若手研究(B)

【研究期間】2009 - 2010

【配分額】4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)

【研究分野】人体病理学

【研究領域課題番号】20249022 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

EBウイルス関連胃癌 / EBウイルス / 胃癌 / エピジェネティクス / LMP2A / SP細胞 / トランスジェニックマウス / マイクロRNA / 幹細胞 / エクソソーム / DNMT1 / STAT3 / 転写因子 / RRM2 / miR200 / 上皮間葉転換 / 胃癌細胞株

【研究成果の概要】

Epstein-Barrウイルス(EBV)関連胃癌において,プロモーター領域CpG部位のメチル化がゲノムワイドに起こっていることを明らかにした.胃癌細胞株MKN7にEBウイルスを感染させ,ゲノムワイドDNAメチル化異常を再現することに成功し,分子機構解明に重要な実験系を確立した.また,潜在期ウイルス遺伝子蛋白LMP2AがDNAメチル化異常に関与していることを明らかにするとともに,DNAメチル化,プロテオソーム等に対する阻害剤を用いたウイルス再活性化療法の可能性について検討した.

【研究種目】基盤研究(A)

【研究期間】2008 - 2012

【配分額】50,310千円 (直接経費: 38,700千円、間接経費: 11,610千円)

【研究分野】病態医化学

【研究領域課題番号】19599024 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

microRNA / DNAメチル化 / ヒストン修飾 / エピジェネティック治療 / 胃がん / エピジェネティクス / H.pylori

【研究成果の概要】

DNAやヒストン(DNAが巻き付いている蛋白質)がメチル化やアセチル化などの修飾を受けると遺伝子の発現が変化することが知られており、これをエピジェネティクスと呼んでいます。本研究ではDNAメチル化阻害薬やヒストン脱アセチル化酵素阻害薬を用いたエピジェネティック治療が胃がん細胞においてmicroRNAという小さなRNA であるmiR-512-5pを誘導し、その標的であるがん遺伝子Mcl-1を不活性化することで細胞死を引き起こすことが示されました。microRNAを介したエピジェネティック治療が胃がんの新たな予防・治療戦略となることが期待されます。

【研究種目】基盤研究(C)

【研究期間】2007 - 2008

【配分額】3,720千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 420千円)