【研究分野】構造生物化学

【研究領域課題番号】23247013 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

リボソーム / 無細胞蛋白質合成系 / リポソーム / シャペロン / ＡＴＰ合成酵素 / トランスロコン / 膜タンパク質 / 自己組織化 / 生体外蛋白質合成系 / 膜蛋白質複合体 / フォールディング / 膜蛋白質 / 蛋白質複合体 / ATPase / トランスコロン / 膜透過機構

【研究成果の概要】

多くの蛋白質は複合体を形成することで制御された機能発現が可能となるが、細胞内の複合体の形成プロセスはほとんど未解明である。本プロジェクトでは、再構築型無細胞蛋白質合成系PURE systemを用いて、ポリペプチドの合成反応と複合体形成を試験管内で再構築を行った。その結果、細胞膜上の２２のポリペプチドから形成されるATP合成酵素、および３つのポリペプチドからなるトランスロコンの合成に成功した。また16SrRNAと20種類の蛋白質からなる超分子複合体であるリボソームの小サブユニット（３０Ｓ）の効率の高い再構築を、さまざまな生合成因子の共存により成功した。

【研究種目】基盤研究(A)

【研究期間】2011-04-01 - 2014-03-31

【配分額】48,360千円 (直接経費: 37,200千円、間接経費: 11,160千円)

【研究分野】生物分子科学

【研究領域課題番号】18201040 (KAKENデータベースで見る）

【研究キーワード】

無細胞蛋白質合成系 / リボソーム / シャペロン / フォールディング / 分泌蛋白質 / 膜蛋白質 / 生体外蛋白質合成系 / フォールデング / GroEL / 翻訳後修飾 / トリッガーファクター

【研究成果の概要】

蛋白質の成熟過程のメカニズム解明することを目標として、再構築した蛋白質合成系PURE systemによって大腸菌ゲノム上の全蛋白質(4132個)の合成を行い、各蛋白質の凝集特性を遠心分離により可溶性を評価した。PURE systemにより合成可能また電気泳動可能であった7割についての評価したところ、凝集しやすさは二峰性を示すことが示された。分子量が小さい蛋白質、等電点が低い蛋白質は可溶性が高いことが示された。また、細胞質の凝集傾向のある蛋白質792個について、シャペロン存在下のPURE systemで合成を行い、その可溶性の向上から、シャペロン依存性を評価した。以上の解析結果をe-Solデータベースとして公開した(http://tp-esol.genes.nig.ac.jp/)。

【研究種目】基盤研究(A)

【研究期間】2006 - 2008

【配分額】51,740千円 (直接経費: 39,800千円、間接経費: 11,940千円)