腎症候性出血熱ウイルス抗体検査システムならびに汚染対応策の検討
【研究分野】実験動物学
【研究キーワード】
実験動物 / 人獣共通感染病 / ウイルス学 / 防圧対策 / 診断法 / ELISA / IFA / PCR / ELIZA
【研究成果の概要】
1.HFRSの原因ウイルスであるハンタウイルスの核蛋白をバキュロウイルスを発現ベクターとして組み換え蛋白として発現させた。この蛋白をELISA用抗原として応用し、ウイルス抗体検査キットの試作品を作成した。
2.本キットについて、国立大学34施設(1,552検体)、公立大学7施設(454検体)ならびに私立大学22施設(816検体),合計63施設、2,822検体を対象に抗体測定が実施された。その結果、74例(2.6%)が目視による判定でプラスと判定された。しかし、それらのプラス判定血清は、腎症候性出血熱ウイルスのうち、血清型HantaanタイプとPuumalaタイプの2種類の抗原を用いた蛍光抗体法とWestern blotting法による確定試験によって、いずれも陰性が確認された。これにより本検査用ELISAキットの信頼性が97%以上の特異性であることが確認された。
3.本ELISAキットの使用抗原および試薬の力価の保存性の検討等がほぼ終了し、市販へ向けての基礎的条件検討が整った。
4.腎症候性出血熱ウイルスの感染が実験動物間で起きた場合の対応マニュアルの作成を目的に、昭和56年に策定された「流行性出血熱(韓国型出血熱)予防指針」の見直しを行った。その結果、動物の血清診断に関する項目を新たに加えること、および、現予防指針の「第3章、流行性出血熱発生時における措置」においての動物血清の検査方法を、市販ELISAキットによる自家検査および外部検査機関への委託とし、実験動物中央研究所および北海道大学医学部附属動物実験施設が必要に応じて対応するように変更する可能性が検討された。
5.今後、本研究班において検討した対応マニュアルと現予防指針との整合性に検討を加えたあと、本マニュアルを動物実験関連施設等へ配布する予定である。
【研究代表者】