花粉細胞を仮死状態からリリースする分子メカニズムの解明
【研究キーワード】
花粉 / 休眠 / 発芽 / 脂質体 / 小胞体
【研究成果の概要】
1)LDのテザリング-リリースモデルの証明
本研究では花粉内でLDと小胞体が癒着した構造を取っていることに着目する.これまでの研究で、シロイヌナズナにおけるアイソフォームa(VPS13a)を欠損した変異体では、花粉発芽時にLDが小胞体からリリースされない事を見出してきた.一方、その他のVPS13とは異なり、AtVPS13aは 中央部にC2と呼ばれるカルシウム依存的な膜結合ドメインを持ち、このC2ドメインを削除することで花粉発芽能力が失われることを前年度までに明らかにした.さらに、VPS13aは花粉管の先端へと局在することを示したが、C2ドメインを失うことでその局在性が失われることを示した.そして免疫沈降法とタンパク質質量分析を用いて、VPS13aの細胞内タンパク質複合体を明らかにし始めた.
2)ライブイメージングと遺伝子操作によるLDの細胞内機能の解析
生細胞におけるLDの可視化系はすでに確立しており、伸長する花粉管の中でそれを捉える事も可能である.一方、LDの形成に関わるSeipinタンパク質の変異体ではLDが巨大化(Taurino et al. 2018)する事が報告されている.これまでの研究でseipin変異体を作出し、それと同時にVPS13aを可視化する系統を作出した.そしてそれらの系統と光褪色後蛍光回復法をもちいてVPS13aの細胞内における挙動の調査を開始した.
【研究代表者】
【研究種目】挑戦的研究(萌芽)
【研究期間】2020-07-30 - 2023-03-31
【配分額】6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)